哺乳动物细胞表达系统是以哺乳动物细胞作为宿主进行蛋白表达生产,具有转录后修饰,蛋白正确折叠与装配等功能,表达的蛋白更接近天然状态,是活性蛋白因子及各类受体蛋白的优异表达系统。利用哺乳动物表达体系生产蛋白通常有两种方式:瞬时转染与稳定转染,这两者都是将目的基因转染至特定哺乳动物细胞内,进而表达得到目的蛋白。但两种方式在原理,操作流程等方面均有所区别。
操作步骤:
1.瞬时转染与稳定转染所用的质粒是不同的,瞬转的质粒不需要带有抗性,而用于稳定转染的质粒一定要带有特定的抗性以便于后续的克隆株筛选。另外,两者所用的培养基及实验试剂也有所区别。
2.瞬时转染的操作比构建稳定细胞系的操作简单,构建好质粒后,经过细胞复苏、转染、细胞培养、蛋白纯化等步骤即可得到目的蛋白;而构建稳定细胞系需要先将构建好的质粒线性化,再得入培养好的哺乳动物细胞内,通过一定的转染方式实现质粒与细胞的融合,接着经过细胞池筛选、单克隆筛选、细胞传代培养等步骤才能得到稳定转染的细胞系。对稳定细胞系进行培养能够长期稳定的生产目的蛋白。
特点:
瞬时转染 | 稳定细胞系构建 |
能够快速生产得到微量至中量的重组蛋白 | 能够长期稳定生产目的蛋白 |
实验成本低 | 得到稳转株之后后续生产蛋白的成本降低 |
一个宿主可以带有多个拷贝,表达效率高 | 能够对基因进行基因插入、基因敲除等编辑操作 |
卡梅德生物技术公司专注于提供蛋白哺乳动物重组表达服务,利用先进的哺乳动物细胞表达系统,如CHO和HEK293细胞,为客户生产高质量的重组蛋白。我们的服务包括基因编码序列的优化、载体构建、细胞转染、表达条件的优化、以及蛋白的提取和纯化。通过精细调控表达系统,我们能够确保重组蛋白具有良好的生物活性和正确的翻译后修饰,满足科研、生物制药以及工业应用的高标准需求。 卡梅德生物拥有丰富的项目管理经验和技术专长,可以为客户提供从概念到生产的全程服务。无论是用于药物研发的关键中间体、疾病研究的实验材料,还是用于诊断试剂的开发,我们都能提供定制化的解决方案,加速项目进展。通过与我们合作,客户可以获得高效、可靠的哺乳动物重组蛋白表达服务,推动其科研成果和产品开发向前发展。