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免疫共沉淀-Co-IP 实验
免疫共沉淀-Co-IP 实验介绍

卡梅德科技(KMD Bioscience)多年致力于蛋白相互作用研究,蛋白质相互作用能够揭示分子之间的相互作用模式,有效揭示体内信号途径转导过程,对调控细胞及其信号具有重要意义。我们的科研专家积累了多年的蛋白互作研究与检测经验,凭借成熟技术能够快速完成实验内容,为客户节省宝贵的时间和经费。此外,卡梅德科技也拥有丰富的重组标签蛋白表达经验,能够在原核和真核表达系统为客户表达带有GST,Myc-tag,Flag-tag,HA-tag等标签的重组蛋白。卡梅德科技建立了成熟的蛋白表达平台,拥有齐全的蛋白检测设备及技术,卡梅德科技的免疫共沉淀(Co-IP实验)以及Pull Down技术来源于日本京都大学IPS实验室,能够确保每一个实验步骤精细控制,保证检测结果准确、客观、可信。卡梅德科技坚持为客户提供高品质的服务内容,能够提供从重组蛋白制备到蛋白表达及纯化,蛋白互作研究等一站式技术服务,个性化定制服务满足不同客户的实验需求。

免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是以抗体和抗原之间的特异性免疫反应为基础的用于研究蛋白质与多肽、蛋白与蛋白相互作用的经典方法,是确定蛋白质与多肽、蛋白与蛋白在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。该技术是利用抗体与抗原之间特异性结合,抗体能够特异性的识别并结合样品中的抗原,再利用琼脂糖交联的protein A/G特异性结合抗体,从而使抗原抗体复合物沉淀下来。经过洗脱,凝胶电泳分离,结合Western Blot 等技术定量或定性的分析样品中特定抗原的含量情况。免疫共沉淀能够验证两种蛋白质在细胞内的天然结合,符合体内实际情况,检测结果可信度高。

免疫共沉淀实验操作步骤较多,但每一步实验步骤都十分关键,要想达到最终的实验目的,不仅需要高质量的抗体,对免疫沉淀体系也需要严格的控制指标。卡梅德科技能够为客户提供高品质的免疫共沉淀技术服务。卡梅德科技的科研人员严格控制实验流程中的每个关键步骤的质量,保证客户能够得到理想的实验结果。

免疫共沉淀技术-卡梅德科技.jpg

图1 免疫共沉淀技术原理

免疫共沉淀技术原理
项目免疫共沉淀-Co-IP实验
实验原理

* 该技术实验原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在琼脂糖凝珠(argarose beads)上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来;再通过Western blot或LC-MS/MS对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用

应用

* 常用于验证两种已知蛋白的相互作用
* 寻找细胞内是否存在与已知蛋白相互作用的未知蛋白


免疫共沉淀技术主要实验流程

免疫共沉淀-Co-IP 实验-卡梅德科技.png

免疫共沉淀技术服务优势

免疫共沉淀-Co-IP 实验优势-卡梅德科技.png

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