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鼠单B细胞单抗制备服务

鼠单B细胞单抗制备服务介绍

卡梅德科技(KMD Bioscience)多年来致力于抗体制备研究。我们拥有经验丰富的抗体制备团队,积累了成熟的技术经验,具有齐全的抗体生产设备,能够为客户提供优质的重组单克隆抗体制备服务,包括兔源,鼠源,驼源,羊源,鸡源等。

小鼠的繁殖速度快,体型小,所需周期短,并且对饲养条件要求不高,各个品系经过几十年的验证,更加稳定,免疫反应明确。由小鼠产生的鼠单克隆抗体作为常见的单克隆抗体,具有特异性强,批次间差异小等特点,并且一般不会产生背景交叉反应。单个B细胞抗体制备技术相较于传统的方法具有速度快、高通量、特异性强等优势。利用该技术从筛选获得的单B细胞中直接PCR获取编码抗体的基因,通过测序、表达载体构建、表达鉴定和纯化一站式服务,卡梅德科技能够为客户在较短的周期内生产出拥有高特异性和高亲和力的鼠单克隆抗体。


单B细胞单抗制备优势

类目

单B细胞技术(single b)

杂交瘤技术

噬菌体展示技术

抗体

天然

天然

非天然

抗体亲和力

中等

可成药性

时间

16~20周,可选快速免疫

20~26周,可选快速免疫

16~20周,可选快速免疫

抗体基因序列

直接获得

需要进一步测序

直接获得

抗体多样性

中等

中等

所能筛选的种属

不限种属

鼠、兔

不限种属


鼠单B细胞技术(single B)抗体制备

卡梅德科技单B细胞单抗制备基于流式细胞分选技术,利用每个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,直接从单个B细胞中扩增出抗体基因,通过重组表达获得特异性抗体。基于单B细胞技术,可以在完成动物免疫后直接从外周血中获取阳性B细胞并克隆抗体基因序列,得到的鼠单克隆抗体具有高特异性、高活性和高亲和力等突出优势。为了满足客户的不同需求,卡梅德生物能够提供从抗原设计,合成与修饰,到动物免疫,单B细胞富集筛选,表达与纯化,功能验证等一站式技术服务。

 

制备流程:

鼠单B细胞技术抗体制备流程-卡梅德科技.png

单B细胞单抗制备服务内容

步骤

服务内容

交付材料

周期

动物免疫

PBMC分离

免疫小鼠4-5次

ELISA效价测定

外周血采集

PBMC分离

ELISA检测结果

标准实验记录

PBMC,1×10^6 cells*10支

4-10周

可选择标准免疫或快速免疫

流式分选

PBMC流式分选

标准实验结果记录

1-2个工作日

单B细胞

培养筛选

5~20板96孔板单B细胞培养和ELISA筛选

阳性克隆筛选结果

标准实验记录

2~3周

可选其他增值验证方法

阳性克隆测序

至少20个阳性克隆进行RT-PCR和测序

RT-PCR结果

测序原始数据

特异性序列

标准实验记录

1周

载体构建

抗体表达纯化

哺乳表达载体构建

细胞转染

ELISA验证

至少3个阳性克隆序列

表达载体

纯化抗体500ug/个阳性克隆

ELISA检测结果

标准实验报告

5~6周

可选其他增值验证方法


样品要求

客户提供

要求

重组蛋白

* ≥2.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供10 mg左右重组蛋白

多肽与小分子

* 裸肽≥10 mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估


单B细胞单抗制备服务优势

单B细胞单抗制备服务优势-卡梅德科技.png

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