原核表达常用的宿主有两种：大肠杆菌和枯草杆菌，两者对比如下：

目前常用的重组蛋白表达质粒载体融合了复制子(Replicon)、启动子(promoter)、筛选标签(selection marker) 、多克隆位点（MCS）和融合蛋白移除策略(fusion tag removal strategy) ，如图1所示：

图1 原核表达载体图谱

卡梅德科技的科学家通过改造pET载体，获得双表达质粒（BiPlasmid vector），该质粒含有双MCS位点，双T7启动子，双lac操纵子和双核糖体结合位点，利用该质粒我们可以为客户进行一次转染操作，而获得两种蛋白的独立表达。同时我们构建了含有低温诱导蛋白表达元件的pCold系列载体，该载体能够在16℃条件下经过IPTG诱导表达大分子量蛋白，如上清表达150kDa活性蛋白。

亲和标签：蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用：一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易；另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类：一类是短肽类标签；一类是长肽以融合蛋白（fused partner）形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析，卡梅德科技总结了常用的一些蛋白标签性质，如表1所示。

重组蛋白的表达往往不像理论那样一帆风顺，在实际的表达过程中有可能产生各种各样的问题。在选择一个蛋白表达策略困难的情况下，那么采用看似笨拙的方法，有可能会成为一种意想不到的“成功捷径”，比如项目要求构建表达两种重组蛋白时，构建6种不同的表达质粒，意味着有36种不同的表达条件组合，通过高通量微量蛋白表达实验一次性就可获得蛋白表达条件组合，后续中式飞行试验和成本控制会变得相对容易。