质粒DNA、siRNA或转染试剂，在含有血清的培养基中稀释，或在血清存在的情况下形成复合物。

使用无血清培养基稀释质粒DNA、siRNA和转染试剂。

稀释时间或复合培养期太短。

我们建议将DNA和转染试剂分别稀释并孵育5分钟。将稀释的试剂一起加入并孵育20分钟以获得最佳性能。

转染的质粒DNA或siRNA降解或质量较差。

确保用于转染的质粒DNA或siRNA具有高质量。

培养基中存在抑制剂。

不要在生长培养基或用于制备DNA的培养基：转染试剂复合物中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸化蛋白多糖。

用于测定效率或表达的分析中存在问题。

使用报告基因来测量转染效率。

细胞无法识别载体上的启动子/增强子。

验证载体构建体上的启动子/增强子是否与靶细胞类型兼容。

随着时间的推移，细胞发生了变化，或者分裂条件发生了变化。

如果转染性能突然下降，可能与细胞有关。 我们建议以一致的时间表分裂和电镀细胞，并保持细胞密度不会太稀疏或过密。 过度分裂也会降低转染性能。