转染,是指将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。理想的细胞转染方法应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。转染技术的选择对转染结果影响较大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。以下例举了主要转染技术的原理及应用特点:
转染方法 | 技术原理 | 应用 | 特点 |
磷酸钙法 | 磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞 | 稳定转染 瞬时转染 | 不适用于原代细胞 操作简便但重复性差 |
电穿孔法 | 高脉冲电压破坏细胞膜电位,DNA通过膜上形成的小孔导入 | 稳定转染 瞬时转染 所有细胞 | 适用性广但细胞致死率高,DNA和细胞用量大 需根据不同细胞类型优化电穿孔实验条件 |
阳离子脂质体法 | 带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞 | 瞬时性转染所有细胞 | 适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清。转染效果随细胞类型变化大 |
DEAE-右旋糖苷法 | 带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成复合物被细胞内吞 | 瞬时转染 | 相对简单,结果可重复,但对细胞有一定的毒副作用。转染时需除血清 |
病毒介导法 | 通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中 | 稳定转染 | 可用于难转染的细胞、原代细胞、体内细胞等。但携带基因不能太大,细胞需处于分裂期 |
基因枪法 | 将DNA用显微重金属颗粒沉淀,再用颗粒传递法将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞,DNA在胞内逐步释放,表达 | 瞬时转染 | 可用于人的表皮细胞,纤维原细胞,淋巴细胞以及原代细胞 |
卡梅德生物技术公司专注于为科研和生物制药领域提供细胞转染及其上下游服务的全面解决方案。我们的服务包括但不限于质粒DNA的构建与抽提、转染试剂的选择与优化、细胞的转染操作、以及转染后的细胞培养管理。进一步地,我们提供基因表达水平的定量分析、蛋白质的表达及其纯化,甚至包含功能性分析和效应验证,旨在为客户提供从基因到蛋白的一站式服务。借助我们的专业知识和先进技术,卡梅德生物能够确保转染效率和表达产物的高质量,帮助客户加速实验进程,优化生物药物的开发流程。我们致力于通过个性化服务,满足不同项目的具体需求,为科学研究和新药开发提供强有力的技术支持。