检测仪器:岛津 PPSQ-31A 蛋白多肽自动测序仪
一、 蛋白质N端测序的主要应用:
1.样品:蛋白质,多肽样品的氨基酸序列测定
2.优势:能连续测定 60 个以上的氨基酸序列
3.来源:天然提取(动物/植物/微生物);合成多肽;重组蛋白等
二、 样品要求:
1.纯度:>95(基于摩尔数)
2.含量:50-100pmol(液体体积控制在 20ul)
3.修饰封闭:N 端未被封闭
4.样品形式:液体;干粉;PVDF 膜
5.无干扰物:蛋白酶;氨基酸;胺;盐分;乙醛;去污剂等
三、 客户提供信息:
1.纯度:纯度检测结果及图谱信息
2.修饰:样品可能修饰情况
3.制备方法:如 SDS,HPLC 及其它方式
4.验证目的:提供理论序列
5.表观分子量
其它注意事项:
1.邮寄要求:使用干冰冷冻保护
2.液体样品:
可用溶剂:蒸馏水、TFA 水溶液、醋酸水溶液、乙氰水溶液以及三甲基胺水溶液。
不可用的溶剂:氨盐、Tris 等,含有 1 级、2 级胺的盐溶液,含有 SDS 的溶液
3.固体样品:
干燥处理的样品,请先确认干燥处理前的溶剂中不含有上述不兼容的溶剂。如果含有不兼容的溶剂时,请告知我方检测人员。
4.PVDF 膜:注意以下方面
1)样品量:5-8 条泳道,每条泳道的样品尽量用最高浓度样品,上最大体积(尽量使条带长胖为正常的 2-3 倍宽度)
2)硝酸纤维素膜:具有耐药性,不能使用。
3)在电转印中使用的缓冲液尽可能不含甘氨酸。在使用了含甘氨酸的缓冲液时,请告知我方检测人员。
4)染色剂推荐使用考马斯亮蓝(CBB-R250)。
5)推荐使用下列的 PVDF 膜:
厂家 | 产品名称 | 规格 | 产品代码 |
日本 Genetex | 8.5x9cm,10pcs | PVM020C8590 | |
13x14cm,10pcs | PVM020C1314 | ||
20x20cm,20pcs | PVM020C2020 | ||
20cmx3m,1roll | VM020C3R | ||
PEBiosystems | ProBlott | 20x20cm,10pcs | 400994 |
MiniProBlott | 10x10cm,10pcs | 401194 | |
BIORAD | 7x8.4cm,10pcs | 162-0186 | |
10x15cm,10pcs | 162-0180 | ||
20x20cm,10pcs | 162-0181 | ||
26cmx330cm,1roll | 162-0184 |
卡梅德生物致力于为客户提供全面的蛋白质分析服务,其中包括蛋白N端测序。我们采用先进的质谱技术和丰富的经验,能够精确确定蛋白质的N端序列,为客户提供准确、可靠的实验结果。无论客户需要对纯化蛋白样品进行测序,还是需要对复杂混合物中的蛋白进行分析,我们都能够满足其需求。我们的专业团队将为您提供快速、高效、精准的服务,确保您获得对蛋白质结构和功能的深入了解。选择卡梅德生物的蛋白N端测序服务,将为您的科研工作提供重要的支持和帮助。