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scFv抗体文库筛选服务
scFv抗体文库筛选服务

scFv(单链可变片段)大小只有25 kDa左右,由IgG的轻链(VL)和重链(VH)可变区组成,由一个柔性肽连接。scFv主要由杂交瘤细胞、小鼠脾脏细胞和人类B淋巴细胞构建而成,具有体积小,特异性和亲和力强的优点。利用其体积小、组织渗透性强、体内清除率高和免疫原性低的优势,scFv被广泛用于疾病的诊断和治疗。此外,scFv可通过哺乳动物细胞、酵母细胞、植物细胞和昆虫细胞等各种表达系统中表达。其中,利用大肠杆菌表达系统,scFv可实现大规模短期制备。

scFv抗体文库筛选的目的是获得与抗原具有亲和力的抗体片段,其中,噬菌体文库筛选应用最为广泛。首先,将抗原固定在聚丙烯微平板上,通过3-5轮筛选,去除结合能力弱的的scFv噬菌体抗体,保留与抗原结合的特异性克隆。噬菌体文库的库容量越大,越有助于得到多样性和亲和力强的scFv抗体。对于噬菌体展示,采用ELISA方法,最终获得阳性克隆;对于酵母展示,则采用 FACS 方法,使用标记抗原使细胞展示重组抗体片段。

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卡梅德科技(KMD Bioscience)在噬菌体展示与筛选领域拥有卓越的成就,我们利用成熟的scFv抗体筛选策略与先进的实验室设备,为全球客户提供高质量的噬菌体展示文库筛选服务。此外,我们可根据客户的需求提供各种定制服务,利用噬菌体或酵母系统对scFv进行展示与筛选。通过噬菌体筛选,我们可以选出亲和力为 10^-8 高亲和力和特异性的 scFv抗体。我们研究人员拥有丰富的抗体库筛选经验,将为客户解决实验中的各种难题,保证项目按质按量完成。我们研究人员还可以通过二代测序 (NGS) ,以高通量的方式筛选噬菌体展示文库。卡梅德科技致力于为客户提供多种抗体库构建及筛选服务,制备高质量的scFv抗体。我们的噬菌体筛选经验丰富,可根据客户需求,对任何形式的抗原进行筛选。经过基于ELISA的生物筛选后,最终获得特异性及亲和力强的scFv抗体。我们筛选周期短,操作严谨,且会对筛选过程进行针对性优化,以期筛选出特异性强的scFv抗体。我们可为客户提供辅助噬菌体的制备及抗体库滴定流程,对scFv抗体库筛选过程进行详细的介绍,解决客户在抗体筛选过程中遇到的各种难题。

scFv抗体文库筛选服务流程
抗体库筛选步骤服务内容周期
抗体库的活化取适当体积的初级抗体库甘油菌,用2×YT-AG扩大培养1天
辅助噬菌体侵染TG1大肠杆菌利用M13KO7辅助噬菌体侵染初级scFv抗体库1天 
噬菌体上清的制备离心后收集噬菌体上清1天 
噬菌体的沉析与滴定利用PEG/NaCl沉析噬菌体1天 
筛选与滴定经3-5轮生物筛选,对抗体库进行滴定,计算库容量1周
阳性克隆的鉴定分析将阳性克隆进行噬菌体上清的制备,用ELISA法鉴定噬菌体上清,用PCR鉴定平板上阳性克隆1天


scFv抗体文库筛选服务优势

--由专业人员定制个性化scFv抗体文库筛选方案

--提供scFv抗体文库筛选建议,优化筛选过程

--筛选的scFv文库多样性好,库容量大

--筛选后得到高质量scFv噬菌体克隆,PCR鉴定阳性率高

--可筛选出客户需要的特异性强的scFv

--实现scFv抗体文库构建、筛选与抗体表达一体化

--提供预制库和天然库,不需要动物免疫,缩短实验周期

--可筛选针对各种形式的抗原,如蛋白,多肽,毒素和细胞等

--可对scFv天然抗体库、免疫库、合成库及半合成库进行筛选

--不需要繁琐的杂交瘤融合步骤,筛选方法简单

--对实验环境要求不高,不易出现交叉污染

--可对库容量大的scFv抗体文库进行筛选

--可通过哺乳动物细胞大规模表达scFv抗体

--基于ELISA筛选过程操作简单,实验周期短


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