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scFv抗体表达服务
scFv抗体表达服务

自杂交瘤技术发展以来,大量具有治疗意义的鼠单克隆抗体在临床广泛应用,有利于各种疾病的诊断与治疗。然而,动物源性的抗体通常具有免疫原性,治疗人类疾病时会迅速从血液循环中排出,并引起全身炎症反应,阻碍了鼠单抗的治疗性效果。scFv等重组抗体尽管近几年在临床实践中应用,但也有一定的免疫原性。抗体人源化技术能够克服这一弊端,有助于降低单克隆抗体及scFv等重组抗体的免疫原性,从而提高药物疗效,提高疾病的治疗效果。

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卡梅德科技(KMD Bioscience)具有多年的重组抗体表达经验,可根据客户需求,利用不同的蛋白表达系统进行scFv的表达。哺乳动物表达系统可将蛋白适当折叠和翻译后修饰,是人类或其他哺乳动物蛋白质表达的首要选择。然而,哺乳动物表达系统具有蛋白产量低的缺点,需要大量扩增,这将会增加实验成本与周期。凭借对哺乳动物表达蛋系统的多年开发经验,卡梅德科技可为客户提供高质量的scFv真核表达服务。我们具有在短时间内制备大量蛋白的优势,可为客户交付理想的蛋白,用于其功能、结构和治疗研究。我们不仅提供CHO和HEK 293等细胞哺乳细胞表达系统,还提供大肠杆菌的原核表达服务。此外,我们还开发了高效的蛋白可溶性表达技术,可避免蛋白的包涵体表达,保证蛋白活性,该技术可用于scFv抗体的大规模生产。卡梅德科技已通过大肠杆菌表达系统成功,为国内外多所机构交付了大量重组蛋白。卡梅德生物还具有完善的杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达体系,用于从杆状病毒感染的昆虫细胞中生产和表达病毒重组蛋白。这种表达系统有利于提高蛋白质的溶解度,并进行翻译后修饰。同时,杆状病毒/昆虫细胞表达系统可同时表达多个基因,形成异源二聚体或多聚体,能产生更高的产量的胞内和分泌蛋白。我们的蛋白表达和纯化平台可用于小规模及大规模生产,满足客户的不同需要。卡梅德科技可利用杆状病毒表达系统支持生产难以表达的蛋白质,如激酶、病毒靶标、细胞表面受体、转运体、各种酶和膜蛋白。我们将全方位满足客户要求,高质量服务贯穿于scFv密码子优化及基因合成、scFv表达小规模测试和放大、scFv纯化和表征全过程。

scFv抗体表达服务流程


步骤 服务内容周期
scFv基因的扩增/密码子优化与合成将已经筛选的scFv基因用PCR扩增或将已知序列的scFv基因进行密码子优化与合成4周
重组质粒构建将scFv基因重组构建在合适的表达载体1周
scFv抗体表达哺乳动物表达系统大肠杆菌表达表达系统杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达酵母细胞表达系统2-3周
有效性验证通过SDS-PAGE、Western Blot等,对表达的抗体进行验证2天


卡梅德科技可以提供
蛋白表达系统 优势细胞
哺乳动物表达系统可将蛋白适当折叠和翻译后修饰

Expi 293F、freestyle 293F、CHO-S、CHO-K1、293T等 

大肠杆菌表达表达系统可大规模制备,操作简单BL21、Nissle 1917、Rosetta等
杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统 可同时表达多个基因,胞内和分泌蛋白产量高Sf9 细胞、Sf21 细胞、Tn-368 细胞和 High Five 细胞
酵母细胞表达系统能够对蛋白进行翻译后修饰,包括二硫键形成和糖基化


scFv抗体表达服务优势

--可通过哺乳细胞表达scFv,蛋白产量大

--可经大肠杆菌系统大量表达scFv

--scFv抗体体内外功能性研究

--可对scFv进行人源化改造

--可表达合成的和半合成的scFv

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