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Fab抗体文库构建服务
Fab抗体文库构建服务

Fab(抗原结合片段)是由全长抗体(如 IgG)经酶解或化学消化而成,大小约为50 KDa,是抗体分子的抗原结合域,包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)、重链1恒定区(CH1)和轻链恒定区(CL)。Fab具有许多优势,在疾病的诊断与治疗方面应用广泛。Fab体积小,能更有效地穿透组织,也更快地从血液中清除。由于没有Fc片段,Fab不会干扰抗 Fc 介导的抗体检测。凭借其渗透性,Fab抗体已成为免疫组化、免疫荧光和流式细胞术等各种研究应用中不可或缺的工具。

Fab抗体文库构建服务-卡梅德科技.png

凭借在重组抗体研究领域的多年经验,卡梅德科技(KMD Bioscience)为客户提供专业的Fab抗体库构建及制备服务。我们制备Fab片段可采用两种不同的方法。第一种方法是对整个抗体进行酶解,即用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和镰刀菌酶等裂解整个抗体,形成 F(ab')2 片段,然后还原这些片段,得到Fab片段。另一种方法是通过重组合成 F(ab')2 抗体片段,然后用化学方法还原这些片段,得到Fab。目前,大多数重组抗体片段都是通过噬菌体展示抗体文库产生的。Fab抗体文库具有明显的优势:首先,与传统繁琐的单克隆抗体相比,Fab 抗体文库能在短时间内快速有效地筛选出Fab抗体。其次,与scFv抗体一样,产生亲和力更高的 Fab 抗体也更容易。第三,Fab 片段的优点是在长期储存条件下高度稳定,与普通检测抗血清兼容。

卡梅德科技构建的Fab抗体库种类丰富,规模庞大,将为客户筛选出找到理想的抗体。我们拥有成熟的Fab抗体文库构建体系,可构建出关于人及各种动物的Fab抗体文库,包括免疫库、天然库、半合成、合成库等,可满足客户的不同需要。我们可构建的Fab抗体库包含噬菌体文库、核糖体文库、mRNA展示、酵母细胞文库、哺乳动物细胞文库及细菌文库等,其中,客户需求最多的是噬菌体展示文库。我们拥有包括M13、T4、T7 和λ噬菌体在内的多种噬菌体展示平台,可满足客户的不同需要,提供个性化Fab噬菌体文库构建服务。我们的研究人员拥有多年的噬菌体文库构建经验,构建的Fab文库大小可达10^10,具有丰富多样性,极大增加了产生高亲和力的Fab抗体的可能性。我们制备的Fab抗体可针对不同的抗原,如病毒、细菌、毒素、受体和肿瘤抗原、多肽等。杂交瘤技术具有操作繁琐、周期长、容易污染和免疫原性高等缺点。噬菌体抗体展示技术操作简单,实验周期短,对环境要求低,且可通过原核表达系统大量表达Fab抗体。我们提供包括PMECS、pComb3X和pCANTAB 5E等多种噬菌粒载体,满足客户不同需要。我们可为客户提供有TG1大肠杆菌、 XL1-Blue和ER2738等多种宿主菌,满足客户的各方面实验需求。卡梅德科技将用心为客户提供全面的Fab文库构建服务,满足国内外科研人员的不同需求。我们的目标是了解和满足不同客户的重组抗体制备需求,并协助解决研究工作中任何问题。


Fab抗体文库构建服务流程
步骤服务内容周期
Fab的制备方法1:用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和镰刀菌酶等将整个抗体裂解,形成 F(ab')2 片段,然后还原这些片段,得到 Fab 片段14天
方法2:通过重组合成 F(ab')2 抗体片段,然后用化学方法还原这些片段,得到Fab
酶切与连接将Fab基因酶切后用T4 DNA连接酶连接1天
质粒转化通过电转化或化学法转化,获得初级Fab抗体库3天
Fab文库多样性测定及PCR验证将文库滴定后计算文库大小;用PCR检验阳性克隆2天


卡梅德生物可以提供
不同类型抗体库不同抗体库展示系统噬菌粒宿主菌人或动物来源组织或细胞
Fab天然库酵母展示、核糖体展示、哺乳细胞展示、细菌展示PMECS、pComb3X和pCANTAB 5ETG1大肠杆菌、 XL1-Blue和ER2738人、鼠、兔、羊、牛等脾脏、人或其他动物的PBMC、杂交瘤
Fab免疫库
Fab合成库
Fab半合成库


Fab抗体文库构建服务优势

Fab抗体文库构建服务优势-卡梅德科技.png

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