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VHH抗体文库构建服务
VHH抗体文库构建服务

VHH抗体来源于驼类(骆驼、美洲驼、羊驼)和鲨鱼,只含有重链抗体,是目前最小的有结合能力的抗体片段,大小只有12-15kDa。驼科动物的免疫系统与众不同,除了拥有原型抗体外,它们的血清中还含有一种失去轻链的抗体,是获得VHH抗体的理想动物来源。VHH体积小,且具有良好的水溶性、稳定性、耐酸性、较低的免疫原性和独特的抗原表位,可快速从血液中清除并深入组织。这些独特的性质使它们在生物传感、亲和力捕获、分子成像、疾病的诊断和治疗领域应用广泛。VHH通常来源于免疫库或天然库,并通过噬菌体或酵母文库展示并筛选。其中,噬菌体展示技术最为常用,通过适当的筛选策略,可以生产出特异性VHH抗体。此外,VHH易于在大肠杆菌中大规模生产,与其他的重组抗体相比,具有独特的抗原结合特性。

VHH抗体文库构建服务-卡梅德科技.png

卡梅德科技(KMD Bioscience)致力于为客户提供针对各种抗原的VHH文库构建服务,利用自身平台优势,可为客户交付库容量为1 × 10^9的VHH噬菌体展示文库。我们善于根据客户需要,凭借在重组抗体建库与筛选的多年经验,提供天然库、免疫库、合成库等多种VHH抗体库构建服务,以期筛选到客户理想的VHH抗体。我们的噬菌体抗体库构建平台拥有M13、T4、T7和λ等多种噬菌体,以满足客户的不同需求。我们构建的VHH文库具有库容量庞大与多样性丰富的优点,可产生高亲和力的VHH抗体。我们根据客户需要,提供个性化文库构建服务。我们可提供包括PMECS、pComb3X和pCANTAB 5E在内的等多种噬菌粒载体,并依据客户需求,对其进行改造。我们可为客户提供有TG1大肠杆菌、XL1-Blue和ER2738等多种大肠杆菌宿主菌,可用于噬菌体侵染。

卡梅德科技在重组抗体的构建与筛选领域拥有先进的技术,不断优化构建抗体文库的能力。我们不仅拥有天然抗体库,还擅长构建VHH免疫文库,有利于产生更加多样化,亲和力强的抗体。我们将制备的抗原免疫羊驼等驼科动物,通过ELISA检测抗体效价,使抗体滴度达到理想水平。抽取动物外周血获得PBMC并提取总RNA,通过反转录和聚合酶链式反应,将VHH基因克隆到噬菌体展示载体中。通过电转化,我们可以制备庞大的VHH抗体库。我们将文库通过筛选并富集,生产出令客户满意的用于研究、诊断或治疗的VHH抗体。我们还有多年的重组抗体表达及纯化经验,在抗体交付之前,会对制备的VHH抗体进行严格的表征和功能鉴定,包括 Western Blot、ELISA、免疫沉淀、流式细胞术或免疫组化等。


VHH抗体文库构建服务流程
步骤服务内容周期
免疫羊驼用抗原免疫羊驼,用ELISA测定血清抗体滴度36天
RNA提取与反转录取羊驼PBMC,提取总RNA后进行反转录1天
VHH基因的扩增以cDNA为模板,扩增VHH基因2天
酶切与连接将VHH基因与质粒酶切后用T4 DNA酶连接2天
质粒转化通过电转化或化学法转化,获得初级VHH抗体库3天
VHH文库多样性测定及PCR验证将文库滴定后计算文库大小;用PCR检验阳性克隆2天


VHH抗体文库构建服务优势

VHH抗体文库构建服务优势-卡梅德科技.png

VHH抗体文库构建优势

--庞大的VHH抗体文库,多样性丰富

--可通过大肠杆菌大规模表达

--操作简单,建库时间短

--VHH文库基因插入率高,阳性率高

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