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scFv抗体表达服务
scFv抗体表达服务

scFv(单链可变片段)由IgG的轻链(VL)和重链(VH)可变区组成,中间由一个柔性肽连接,大小约25 kDa。scFvs结构简单,可保持对其抗原的特异性和亲和力,不需要恒定的抗体区域。scFv主要由杂交瘤细胞、小鼠脾脏和人类B淋巴细胞构建而成。由于其体积小,具有良好的组织渗透性,体内清除率高,免疫原性低,广泛用于疾病的诊断和治疗。此外,scFv可通过哺乳动物细胞、酵母细胞、植物细胞和昆虫细胞等各种表达系统中表达。其中,大肠杆菌表达系统操作方便,制备周期短,培养条件简单,可用于scFv抗体的大规模制备。

scFv抗体表达-卡梅德科技.png

卡梅德生物(KMD Bioscience)具有多年的重组抗体表达经验,可根据客户需求,利用不同的蛋白表达系统进行scFv的表达。哺乳动物表达系统可将蛋白适当折叠和翻译后修饰,是人类或其他哺乳动物蛋白质表达的首要选择。然而,哺乳动物表达系统具有蛋白产量低的缺点,需要大量扩增,这将会增加实验成本与周期。凭借对哺乳动物表达蛋系统的多年开发经验,卡梅德生物可为客户提供高质量的scFv真核表达服务。我们具有在短时间内制备大量蛋白的优势,可为客户交付理想的蛋白,用于其功能、结构和治疗研究。我们不仅提供CHO和HEK 293等细胞哺乳细胞表达系统,还提供大肠杆菌的原核表达服务。此外,我们还开发了高效的蛋白可溶性表达技术,可避免蛋白的包涵体表达,保证蛋白活性,该技术可用于scFv抗体的大规模生产。卡梅德生物已通过大肠杆菌表达系统成功,为国内外多所机构交付了大量重组蛋白。卡梅德生物还具有完善的杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达体系,用于从杆状病毒感染的昆虫细胞中生产和表达病毒重组蛋白。这种表达系统有利于提高蛋白质的溶解度,并进行翻译后修饰。同时,杆状病毒/昆虫细胞表达系统可同时表达多个基因,形成异源二聚体或多聚体,能产生更高的产量的胞内和分泌蛋白。我们的蛋白表达和纯化平台可用于小规模及大规模生产,满足客户的不同需要。卡梅德生物可利用杆状病毒表达系统支持生产难以表达的蛋白质,如激酶、病毒靶标、细胞表面受体、转运体、各种酶和膜蛋白。我们将全方位满足客户要求,高质量服务贯穿于scFv密码子优化及基因合成、scFv表达小规模测试和放大、scFv纯化和表征全过程。

服务流程

步骤

服务内容

周期

scFv基因的扩增/密码子优化与合成

将已经筛选的scFv基因用PCR扩增或将已知序列的scFv基因进行密码子优化与合成

4周

重组质粒构建

将scFv基因重组构建在合适的表达载体

1周

scFv抗体表达

哺乳动物表达系统
大肠杆菌表达表达系统
杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达
酵母细胞表达系统

2-3周

有效性验证

通过SDS-PAGE、Western Blot等,对表达的抗体进行验证

2天


卡梅德生物可以提供
蛋白表达系统优势细胞
哺乳动物表达系统可将蛋白适当折叠和翻译后修饰Expi 293F、freestyle 293F、CHO-S、CHO-K1、293T等
大肠杆菌表达系统可大规模制备,操作简单BL21、Nissle 1917、Rosetta等
杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统可同时表达多个基因,胞内和分泌蛋白产量高Sf9 细胞、Sf21 细胞、Tn-368 细胞和 High Five 细胞
酵母细胞表达系统能够对蛋白进行翻译后修饰,包括二硫键形成和糖基化GS115、X33等


卡梅德生物scFv抗体表达服务优势

scFv抗体表达服务优势-卡梅德科技.png

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