驼科动物(骆驼、美洲驼和羊驼)的免疫系统与其他动物不同,它们的血清中除了包含传统的IgG外,还含有一种失去轻链的VHH抗体。VHH大小只有13-15 kDa,具有体积小,稳定性好,溶解性高以及能快速从血液中清除并深入组织的特点,比抗体片段更具有独特的抗原结合特性。利用这些优势,VHH广泛应用于成为生物传感、亲和力捕获、蛋白质结晶、分子成像、疾病的诊断和治疗等领域。
卡梅德生物(KMD Bioscience)针对客户的不同需求,提供个性化噬菌体抗体库构建、筛选、表达及抗体纯化策略。我们依据客户需要,可用各种类型的抗原免疫羊驼,构建基于噬菌体展示技术的VHH免疫抗体库。我们构建VHH免疫文库具有多样性,能有效产生对抗原有较强亲和力的VHH。此外,我们实验室保存有预制的天然免疫文库,不需要免疫动物,大大缩短了VHH制备时间。我们还可根据客户需求构建基于VHH的合成库和半合成库。我们分离出羊驼的外周血单个核细胞(PBMC),将获取的VHH基因克隆到噬菌体展示载体中,通过反转录和聚合酶链式反应,可以产生庞大的VHH抗体库。我们利用客户所需的抗原,该文库进行多轮筛选与富集,从而获得满足客户需要的,用于研究、诊断或治疗的VHH抗体。
卡梅德生物拥有完善的重组抗体表达平台,可根据客户需求,利用不同的蛋白表达系统进行VHH表达。哺乳动物表达系统是人或其他哺乳动物蛋白质表达的首要选择,在科研中最为常用。哺乳动物表达系统能正确且有效地识别真核蛋白的合成、加工和分泌信号,具有与天然蛋白相似的结构和功能,可进行糖基化、磷酸化和乙酰化等翻译后修饰,表达及纯化过程简单,易于重组质粒的转染。然而,哺乳动物表达系统制备蛋白通通常具有产量低和制备周期长的缺点。卡梅德生物多年来专注于哺乳动物表达系统的优化与研究,可为客户提供产量高且质量好的VHH表达服务。我们善于利用HEK293或CHO细胞系进行蛋白的瞬时和稳定表达VHH。
我们还可利用大肠杆菌原核表达系统制备可溶性蛋白,对蛋白表达条件进行优化,避免蛋白的包涵体表达,保证蛋白活性。卡梅德生物还具有成熟的杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达体系,用于从杆状病毒感染的昆虫细胞中生产和表达病毒重组蛋白。这种表达系统有利于提高蛋白质的溶解度,并进行翻译后修饰。同时,杆状病毒/昆虫细胞表达系统可同时表达多个基因,能产生更高的产量的胞内和分泌蛋白。我们的蛋白表达平台可用于VHH小规模及大规模生产,满足客户的不同需要。我们将全方位满足客户要求,为客户提供VHH筛选、表达及纯化一体化服务。我们会根据客户需要对VHH进行表征和功能鉴定,保证VHH的制备质量。